对于蒙古族等少数民族而言

我国幅员辽阔，气相确定地理环境和生活方式多样，色谱酸西北部地区的测定内蒙、新疆和西藏地区覆盖着大面积的鲜马草原。对于蒙古族等少数民族而言，奶中马奶是脂肪其饮食文化中很重要的一部分。当地的度评定牧民不仅有饮用鲜马奶的习俗，还会用马奶最为食品原料制作酸马奶等其他乳制品。气相确定

有研究发现，色谱酸马奶中的测定蛋白质含量在2%左右，且含有较多的鲜马乳清蛋白和酪蛋白，马奶中的奶中乳糖含量、脂肪和微量元素都和人乳较为接近，脂肪且含有丰富的度评定维生素C，易于人体消化吸收。气相确定且有学者发现马奶对人体还有一定的保健作用。古代中医、蒙医和藏医的医术中对于马奶发酵后的医疗保健功效早有记载，即具有润肺开胃、降血压、降血脂、改善心脏功能等保健作用。有临床研究证实，马奶对于预防和治疗高血压、冠心病和其他慢性消化系统疾病都有明显的作用。

脂肪酸是乳品营养中重要的组成部分，也是氧化提供能量的重要来源，某些必需脂肪酸还有维持细胞膜功能、保持器官和组织的通透性、降低血脂等特殊功效和保健功能。马奶中含有较为丰富的脂肪酸，是很多对人类健康有益的脂肪酸的天然来源。在测定乳制品的脂肪酸中，有测定婴幼儿乳粉中脂肪酸组成、植物蛋白饮料中脂肪酸组成等方法，但目前国内尚无针对鲜马奶进行脂肪酸测定的方法，结合实际鲜马奶中水分、脂肪、蛋白质等组分含量的水平，可将鲜马奶中的脂肪酸甲酯化后再经气相色谱分析，根据测定结果选取标志性的脂肪酸，通过探究其线性范围、精密度、检出限及回收率来验证方法的准确性和可行性。建立数学模型，从实验操作和计算过程分析，按照《化学分析中不确定度的评估指南》评定该方法的不确定度，对以鲜马奶为代表的多种乳制品分析过程的不确定度评定具有借鉴意义。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

正己烷：色谱纯；37种脂肪酸甲酯混标：Supelco，西格玛公司；棕榈酸（C16∶0）脂肪酸甲酯标准品：上海安谱公司；鲜马奶：购自武汉市某大型超市，取样前检查完整包装，并充分混合均匀。

1.2 仪器与设备

Angilent7890B型气相色谱仪（带氢火焰离子化检测器FID）：安捷伦科技有限公司；SupelcoSP-2560色谱柱（100m×0.25mm×0.2μm）；ME204E型电子天平：梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；SK8200HP型超声波清洗机：上海科导超声仪器有限公司；XW-80A型涡旋混合器：上海精科实业有限公司；LD5-2B型离心机：北京京立离心机有限公司。

1.3 检测方法

选取新鲜的马奶样品，将样品充分摇匀，使其没有明显的分层。均匀取样10g置于50mL离心管中，加入0.05mL的盐酸水溶液（1+1），再加入10mL的正己烷，振摇3min，中间分多次小心放气。离心10min后取上清液2.0mL于10mL具塞试管中，加入0.8mL的氢氧化钾-甲醇溶液（体积分数0.5%），涡旋1min后静置10min，取上清液上机分析。

37种脂肪酸甲酯混标直接上机，样品与标准品均采用以下气相色谱检测条件进行分析：

进样口温度：260℃，分流比40∶1，检测器温度260℃，载气为高纯度氮气，流速1mL/min。

程序升温步骤：初始温度100℃，保持5min，以8℃/min升温到176℃，保持5min，再以2℃/min升温到200℃，保持5min，最后以2℃/min升温到240℃，保持8.5min。

2 鲜马奶中脂肪酸组成分析

通过上述实验操作经气相色谱分析后可得到鲜马奶的脂肪酸组成气相色谱图（如图1），37种脂肪酸甲酯混标气相色谱图（如图2）。

通过色谱图分析可知，鲜马奶中主要含有C8∶0、C10∶0、C12∶0、C14∶0、C14∶1、C16∶0、C16∶1、C18∶0、C18∶1n9c、C18∶2n6c、C20∶1这11种脂肪酸，并且C16∶0、C18∶1n9c、C18∶2n6c这三种脂肪酸的含量占比较高，本文选取C16∶0棕榈酸为标志性脂肪酸（下述棕榈酸）来进行方法验证和不确定度评定。

3 方法验证

3.1 线性范围和相关性

将1.1中的棕榈酸甲酯标准品用正己烷稀释成浓度梯度为：50.75μg/mL、101.5μg/mL、203.0μg/mL、507.5μg/mL、1015μg/mL的标准曲线溶液，直接上机分析，以棕榈酸甲酯的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，标准曲线计算得到线性方程为：y=0.680x+13.29，相关系数为R²=0.999，这说明棕榈酸甲酯在50.75～1015μg/mL范围内有良好的线性关系，线性曲线如图3。

3.2 精密度及检出限

将同一鲜马奶样品在重复性的条件下检测棕榈酸的含量，获得六次独立测定结果的RSD为2.7%，符合常规实验精密度的要求。

因乳制品中普遍含有棕榈酸，故选用空白试剂加标的方法验证检出限。选取线性范围的最低点50.75μg/mL加标，按照上述方法测定，计算信噪比可知大于3，符合常规实验的检出限要求。

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